«Ночь в музее» повествует историю Ларри Дэйли — изобретателя-неудачника, стремящегося стать полезным миру. Его идеи не пользуются популярностью, ему не удаётся найти нормальную работу, из одного съёмного угла ему приходится переселяться в другой, так как платить ему нечем. Бывшая жена Ларри запрещает ему видеться со своим сыном, полагая, что непутёвый отец не сможет стать хорошим примером для подражания и повредит развитию личности ребёнка.
Но Ларри не сдаётся: в очередной раз решив попытать счастья, он устраивается ночным сторожем в Музей естественной истории. В этом музее есть экспонаты из самых разных периодов человеческой истории и самых разных уголков природы Земли. И всё бы ничего, но предыдущие охранники какие-то странные и подозрительные ребята, так настойчиво требующие усвоить инструкцию… Что может быть проще, чем охранять пустой музей?
Не тут-то было. В музее происходит ни много ни мало волшебство: все фигуры зверей и животных ночью оживают. По коридорам носится оживший скелет тираннозавра, крошечные ковбои выясняют свои отношения с крошечными римлянами, львы и обезьяны гуляют среди джунглей зала тропиков, а посвящённый Гражданской войне зал становится ареной боевых действий манекенов солдат Севера и Юга. Ночь в музее становится и кошмарна, и прекрасна одновременно: ведь нужно сохранить экспонаты друг от друга и удержать внутри! Как Ларри будет справляться с гордыми ковбоями и не менее гордыми римлянами.
